再请教MSP纯化问题 - 谢谢hula! (Apr/16/2004 )
谢谢您两次援手,给了我很大帮助,我从您提供的网站Protocols 之二下载了Silica Purification of DNA (Aroian Lab, University of California, San Diego) new For clean-up of DNA from gel,还有几处不明,麻烦您再指点一下,谢谢!
1:Silica是否为SIGMA公司购买?
2:配制Silica Suspension过程中,所用水是否为三蒸水,还是一般蒸馏水?
3:NaOAc是否为分析纯醋酸钠?
4:所用试剂是否国产亦可?
5:sediment silica matrix by centrifugation是否为瞬时离心即可?
6:pellet silica once more to remove any residual wash solution中的pellet silica once more是否再次离心一次即可达到目的?
7:所有离心是否均可常温,还是要低温离心机?
1:Silica是否为SIGMA公司购买?
是的,但其他公司也可
2:配制Silica Suspension过程中,所用水是否为三蒸水,还是一般蒸馏水?
只要保证没有DNA污染就可
3:NaOAc是否为分析纯醋酸钠?
应该是
4:所用试剂是否国产亦可?
当然
5:sediment silica matrix by centrifugation是否为瞬时离心即可?
5000g 离心10秒即可,离心太久,不易再溶解
6:pellet silica once more to remove any residual wash solution中的pellet silica once more是否再次离心一次即可达到目的?
最好洗3次
7:所有离心是否均可常温,还是要低温离心机?
常温
hula:
谢谢你的帮助,有困难再找你咨询,谢谢了!